Bài giảng Môn: vi sinh môi trường

*BINH DUONG UNIVERSITY*TRƯỜNG ĐẠI HỌC BÌNH DƯƠNGKHOA CÔNG NGHỆ SINH HỌCBÁO CÁO SEMINARMÔN: VI SINH MÔI TRƯỜNG	GVHD: Th.s BẠCH PHƯƠNG LAN	SVTH: NHÓM 9 *BINH DUONG UNIVERSITY*Đề tài: CÔNG NGHỆ SẢN XUẤT THUỐC TRỪ SÂU SINH HỌC Bt ( Bacillus thuringiensis)Nội dung Mở đầu Thuốc trừ sâu Bt Vi khuẩn Bacillus thuringiensis Cơ chế tác động Ưu điểm, hạn chế và biện pháp khắc phục khi sử dụng thuốc trừ sâu Bt Kết luận*BINH DUONG UNIVERSITY*BINH DUONG UNIVERSITY** Hiện nay, sự phát triển của nền nông nghiệp nước ta đang đi vào mức độ thâm canh cao với việc sử dụng ngày càng nhiều phân bón hóa học, thuốc bảo vệ thực vật hóa học và hàng lọat các biện pháp như trồng lúa 3 vụ, phá rừng canh tác cà phê, hồ tiêu, điều với mục đích khai thác, chạy theo năng suất và sản lượng TRỒNG BẮP CHUYÊN CANH Ở MỸTRỒNG LÚA MÌ TĂNG VỤTRỒNG MÍA TĂNG VỤBINH DUONG UNIVERSITY** Chính vì vậy, xu hướng quay trở lại nền nông nghiệp hữu cơ với việc tăng cường sử dụng chế phẩm sinh học, phân bón hữu cơ trong canh tác cây trồng đang là xu hướng của Việt Nam nói riêng và thế giới nói chung.*BINH DUONG UNIVERSITY* Đây là loại thuốc trừ sâu thuộc nhóm trừ sâu sinh học, có nguồn gốc vi sinh vật (Bacillus thuringiensis var.), phổ diệt rộng và hữu hiệu với các lọai sâu như sâu cuốn lá, sâu tơ, sâu xanh, sâu khoang, sâu ăn tạp Nói về thuốc trừ sâu vi sinh Bt:*BINH DUONG UNIVERSITY* Ở Việt Nam, chế phẩm Bt (Bacillus thuringiensis var.) đã được nghiên cứu từ năm 1971. Hơn 20 chế phẩm Bt nhập khẩu và nội địa đã cho kết quả tốt trong phòng thí nghiệm và ngoài đồng đối với một số sâu hại chính trên đồng ruộng như sâu xanh bướm trắng, sâu xám, sâu tơ, sâu hại bông, sâu đo. *BINH DUONG UNIVERSITY*Các lọai sản phẩm thương mại có trên thị trường khá nhiều như Vi-BT 32000WP, 16000WP; BT Xentary 35WDG, Firibiotox P dạng bột; Firibiotox C dạng dịch cô đặc ...THUỐC TRỪ SÂU Vi-BT 32000WP VI KHUẨN BACILLUS THURINGIENSIS*BINH DUONG UNIVERSITY**BINH DUONG UNIVERSITY*Bacillus thuringensis Bt là trực khuẩn sinh bào tử hiếu khí không bắt buộc, gram dương, kích thước 3-6 µm, có phủ tiên mao không dày, tế bào đứng riêng rẽ và xếp thành từng chuỗi, chứa tinh thể độc có khả năng diệt sâu.Bt phát triển trong điều kiện nhiệt độ 15-45 oC nhưng thích hợp nhất 29-30 oC. Bào tử dạng hình ovan, hình trứng dài 1,2 – 1,6 µm.BÀO TỬ BACILLUS THURINGIENSIS*BINH DUONG UNIVERSITY*Vi khuẩn Bacillus thuringiensis (Ảnh: ed.ac.uk)*BINH DUONG UNIVERSITY*Khuẩn lạc vi khuẩn Bacillus thuringiensis*BINH DUONG UNIVERSITY*Tế bào Bt kết thành chuỗi Hầu hết là các chủng Bt có một hoặc nhiều gen tiền độc tố. Cơ sở gây bệnh cho côn trùng chính là các gen Cry khác nhau. Gen Cry được chia thành 4 lớp chính: Cry I, II, III, IV.Gen Cry I: Thường tổng hợp các Protein hình thoi gây bệnh cho côn trùng bộ cánh vẩy.Gen Cry II: Tạo tinh thể dạng hình tháp gây bệnh cho côn trùng bộ cánh vẩy và côn trùng bộ 2 cánh. Ví dụ như gen Cry IIA gây bệnh cho loài Lymantria dispa , Cry IIB Helicoverpa armigera.*BINH DUONG UNIVERSITY*Sâu Lymantria dispa*BINH DUONG UNIVERSITY*Helicoverpa armigeraCác loài thuộc bộ cánh cứng ColeopteraGen Cry III: Tổng hợp tinh thể dạng hình thoi, gây bệnh cho côn trùng bộ cánh cứng Coleoptera.Gen Cry IV: Tổng hợp cả tinh thể dạng hình thoi và hình tháp, chỉ gây bệnh cho côn trùng bộ 2 cánh Diptera.*BINH DUONG UNIVERSITY**BINH DUONG UNIVERSITY*Cơ chế tác độngKhi được phun lên lá cây, protein độc tố dưới dạng tinh thể sẽ diệt những loại sâu hại nhất định. Cụ thể là sau khi sâu hại ăn phải các tinh thể tiền độc tố, dưới tác dụng của một loại men tiêu hoá trong dịch ruột của sâu, tiền độc tố bị hoà tan thành những phân tử nhỏ có hoạt tính độc.Các độc tố này bám vào màng vi mao trong ruột, tạo ra các lỗ rò để cho nước chảy vào, làm sâu mọng nước, ngừng ăn và chết. *BINH DUONG UNIVERSITY*Tinh thể protein tiền độc tố nằm trong bào tử Bt*BINH DUONG UNIVERSITY*Cơ chế tác động của tinh thể Bt sau khi xâm nhập vào cơ thể sâuSản xuất thuốc trừ sâu BtỞ Việt Nam hiện nay có khoảng 10 chủng Bacillus thurigensis được phân lập để sản xuất thuốc trừ sâu sinh học.*BINH DUONG UNIVERSITY*Mỗi chủng vsv chỉ chứa 1 hoặc 1 vài gene tổng hợp protein gây độc với 1 lọai sâu nhất định.Do đó, để sản xuất được chế phẩm diệt được nhiều lọai sâu, người ta tiến hành xác định ( có chọn lọc ) những đọan gene tổng hợp protein gây độc đó, rồi dùng kĩ thuật chuyển gene để đưa vào 1 chủng Bt.*BINH DUONG UNIVERSITY*Chủng giống Bt này sau đó được cấy vào bình lên men, trong điều kiện nhiệt độ thích hợp (28-30 độ C). Sau khoảng 52-54 giờ là có thể thu hoạch được dịch thể chứa các tinh thể protein độc tố đối với sâu hại.*BINH DUONG UNIVERSITY**BINH DUONG UNIVERSITY*Nhân giống cấp 2Kích thích lên menLọc và ly tâmNhân giống cấp 1Chủng Bt thuầnThu sinh khối52 – 54h, pH = 7, 30OC Sơ đồ tổng quát qui trình tạo thuốc trừ sâu BtƯu điểm, hạn chế và biện pháp khắc phục khi sử dụng thuốc trừ sâu Bt*BINH DUONG UNIVERSITY**BINH DUONG UNIVERSITY*Ưu điểmKhông gây ô nhiễm môi trường.BT có hiệu lực cao đối với sâu đã kháng các loại thuốc gốc lân, carbamat,Tinh thể độc do Bt tạo ra không thể hoà tan trong dịch dạ dày của người nên thuốc trừ sâu sinh học Bt hoàn toàn vô hại đối với người, cũng như các sinh vật khác.Không độc với cá, ong mật và các loài thiên địch.Thời gian cách ly ngắn.Kết quả thử nghiệm cho thấy các chế phẩm Bt diệt được gần 90% sâu hại, so với gần 80% của thuốc hoá học. Hạn chếChỉ diệt được sâu non khi chúng ăn lá, không diệt được trứng, nhộng và bướm.Dễ bị phân huỷ bởi tia cực tím có trong ánh mặt trời.Có tác động vi độc, không nội hấp, không tiếp xúc.Hạn chế lớn nhất của thuốc trừ sâu Bt là phát tác chậm 48 tiếng sau khi ăn độc tố thì sâu mới chết.*BINH DUONG UNIVERSITY* Khắc phụcNên chú ý phun sớm ngay khi cây trồng bị sâu phá hại, thích hợp nhất là sâu còn non từ 1 đến 3 tuổi. Do sâu thường gối lứa nên sau khi phun 5-7 ngày, khi cần thiết phải phun lại một lần nữa để diệt sâu non mới nở.*BINH DUONG UNIVERSITY*Nên phun thuốc vào lúc chiều mát, lúc này sâu dễ dàng trúng độc do thường bò lên ăn vào ban đêm. Tránh phun thuốc khi trời đang nắng gắt hoặc sắp mưa. Sau khi tưới hãy phun thuốc và 1 ngày sau đó có thể tưới trở lại. Không sử dụng thuốc trừ sâu Bt trên cây dâu dùng nuôi tằm. Cần phun ướt đều hai mặt lá nhất là mặt dưới và các bộ phận của cây mà sâu thích ăn; có thể thêm một ít mật rỉ đường để tăng sự bám dính thì hiệu quả diệt sâu sẽ cao hơn. Mặc dù có những nhược điểm ko thể tránh khỏi nhưng hiệu quả của thuốc trừ sâu sinh học từ vi khuẩn Bacillus thuringiensis là không thể phủ nhận.Với những đặc tính không gây hại cho môi trường và sinh vật có lợi thì chế phẩm sinh học ( thuốc trừ sâu Bt, Entomopathogenic Nematodes – EPN, thuốc trừ sâu róm bằng nấm Boverin) nên được sử dụng rộng rãi để thay thế các sản phẩm hóa học nhằm hướng đến mục tiêu chủ yếu là bảo vệ môi trường sống*BINH DUONG UNIVERSITY*Tài liệu tham khảowww.tvtl.bachkim.vnwww.sciencephoto.com*BINH DUONG UNIVERSITY**BINH DUONG UNIVERSITY*